隨著畜牧業向集約化和規?;较虬l展,如何控制疾病的發生是養殖者首要關注的問題。在這個問題的解決上,抗生素曾經扮演了相當重要的角色,對促進畜牧業的發展起到了重要的作用。然而,隨著食品安全問題的出現及生活水平的提高,人類對綠色無公害畜產品的需求日益高漲,在畜牧業生產中禁用抗生素的浪潮己經席卷全球。
隨著畜牧業向集約化和規?;较虬l展,如何控制疾病的發生是養殖者首要關注的問題。在這個問題的解決上,抗生素曾經扮演了相當重要的角色,對促進畜牧業的發展起到了重要的作用。然而,隨著食品安全問題的出現及生活水平的提高,人類對綠色無公害畜產品的需求日益高漲,在畜牧業生產中禁用抗生素的浪潮己經席卷全球。因此,開發天然、綠色、無殘留的飼料添加劑勢在必行。大量研究表明,益生菌具有促進機體免疫功能、提高飼料消化率的作用,是一種具有潛在優勢的替代抗生素的天然綠色飼料添加劑。本研究通過在仔豬飼料中添加益生菌、α-甘露聚糖肽,研究其對仔豬生產性能、免疫功能的影響,旨在為提高仔豬抗病力及替代抗生素的研究提供理論依據。
1 材料與方法
1.1試驗用益欣元
1.2試驗動物與試驗日糧
選用20頭28士3d斷奶體重相近的長x大二元雜交仔豬,斷奶后繼續飼喂14d乳豬料,然后更換仔豬料,預飼2天后正式開始試驗。試驗仔豬按體重、性別、窩別致的原則隨機分為2組,每組設10頭豬。第I組為對照組,飼基礎日糧;第II組在基礎日糧中添加1000g/t的益欣元?;A日配方按照NRC(1998)豬飼養標準進行配制,配方及營養水平見表1。
1.3試驗場地與飼養管理
試驗在信陽市富華牧業有限公司豬場進行。試驗仔豬于28日齡斷奶,斷奶后繼續喂兩周乳豬全價料,于42日齡更換仔豬全價料,預飼2d后,于44日齡正開始試驗,試驗期28天。網床飼養,半漏縫地板,舍溫保持在22一25℃,豬欄面為2mx2m。自動喂料槽,乳頭式飲水器。粉料飼喂,自由采食和飲水。按豬場常管理程序進行驅蟲和免疫。
1.4試驗過程與樣品制備
于試驗開始(第0d)、14d和28d仔豬個體空腹稱重,計算平均日增重(ADG);按重復統計給料量和剩料量,計算平均日采食量(ADFI)和耗料增重比;連續收集試驗結束前一周各重復的飼料樣品,混合制備飼料樣本,待測;連續收集試驗結束前一周各重復的糞便樣品,待測;在試驗第28d清晨,前腔靜脈采血 10mL分成2份,3000r/min離心,制備血清-20℃保存待測。
1.5檢測指標及測定方法
1.5.1檢測指標
糞便成分:粗蛋白、粗脂肪;
生產性能指標:平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、耗料增重比(F/G)、營養物質消化率、腹瀉頻率;
1.5.2檢測方法
1.5.2.1飼料及糞便成份
粗蛋白質、粗脂肪、鈣和總磷分別參照中華人民共和國國家標準GB/T6432一1994、GB/T 6433一2006、GB/T 6436一2002和GB/T 6437一2002推薦的方法測定。其中,粗蛋白采用凱氏定氮法進行測定,粗脂肪采用索氏浸提法進行測定,鈣采用高錳酸鉀滴定法進行測定,總磷采用釩鋁酸銨比色法進行測定。
1.5.2.2營養物質消化率
于試驗結束前一周收集各重復的新鮮糞便,收集時間為每天上午8:00、下午5:00然后從每次收集的糞樣中分離出一部分,滴加10%的鹽酸以固氮。收集完畢后,將糞樣混勻,60℃一70℃烘干制成風干樣本,用于測定粗蛋白質消化率。未滴加鹽酸固氮的糞樣用于測定粗脂肪的消化率。消化率測定采用內源指示劑法,指示劑用4N一Hcl不溶灰分。
計算公式:某養分消化率(%)=100一(a÷b)x(c÷d)xl00
其中: a一飼料中酸不溶灰分;b一糞樣中酸不溶灰分;c一糞樣中某養分含量;d一飼料中某養分含量。
1.5.2.3腹瀉頻率
試驗開始5d后,連續觀測記錄15d各重復仔豬的腹瀉情況,計算腹瀉頻率。
計算公式:腹瀉頻率(%)=腹瀉頭日數總和/(試驗豬頭數x試驗天數)x100%
其中:腹瀉日頭數是指每天有一頭仔豬腹瀉,為一個頭日數。
1.6統計分析
應用SPSS模型進行單因素方差分析,結果表示為平均值士標準差(x士SD)。
2 結果與分析
2.1益欣元對仔豬生產性能的影響
2.1.1益欣元對仔豬各階段體重和日增重的影響
益欣元對仔豬各階段體重和日增重的影響見表2。由表中可以看出,第II組14d體重比第I組提高了3.59%,差異顯著(P<0.05), 第II組末重比第I組提高了3.72%(p<0.05)。在試驗0d一14d期間,第II組平均日增重比第I組提高了8.00%(p<0.05), 14—28d期間,第II組平均日增重比第I組提高了6.81%(P<0.05);試驗全期,即0d一28d,第II組平均日增重比第I組提高了5.99%(p<0.05) 。
注:同行肩標小寫字母相同者差異不顯著(P>0.05);同行肩標小寫字母相鄰者差異顯著(P<0.05).同行肩標小寫字母相隔者差異極顯著(P<0.01)。
2.1.2益欣元對仔豬采食量的影響
益欣元對仔豬采食量的影響見表3。由表中可以看出,在平均日采食量方面,0d一14d期間第II組與第I組差異均不顯著。14d一28d期間,第II組比第I組提高了l.48%(P>0.05)、 試驗全期,即0d一28d,第II組與第I組之間差異顯著(p<0.05),提高了2.06% 。
注:同行肩標小寫字母相同者差異不顯著P>0.05);同行肩標小寫字母相鄰者差異顯著(P<0.05).同行肩標小寫字母相隔者差異極顯著。
2.1.3益欣元對日糧養分表觀消化率和腹瀉頻率的影響
益欣元對仔豬營養物質消化率的影響見表5。由表中可以看出,粗蛋白消化率第II組比第I組提高3.16% (P<0.05) ;第II組粗脂肪消化率較第I組提高了1.53%,但沒有達到統計學顯著水平(p>0.05)。
注:同行肩標小寫字母相同者差異不顯著P>0.05);同行肩標小寫字母相鄰者差異顯著(P<0.05).
益欣元對仔豬腹瀉頻率的影響見表6。由表中可以看出,第II組腹瀉頻率與第I組相比下降了23.08%,差異顯著(p<0.05)。
注:同行肩標小寫字母相同者差異不顯著P>0.05);同行肩標小寫字母相鄰者差異顯著(P<0.05).
2.1.4益欣元對仔豬疫苗免疫后抗體水平的影響
益欣元對仔豬疫苗免疫后抗體水平的影響見表7-9。由表中可以看出, 第II組豬瘟、豬偽狂犬及豬圓環病毒抗體水平與第I組相比有顯著提高(P<0.05)。
測定豬瘟、豬偽狂犬、豬圓環病毒抗體水平,均采用ELISA檢測方法。
豬瘟抗體水平分別在28d,72d前腔靜脈采血,分離血清,測定抗體。
注:同行肩標小寫字母相同者差異不顯著P>0.05);同行肩標小寫字母相鄰者差異顯著(P<0.05).
豬偽狂犬抗體水平分別在28d,70d(二次免疫后35d)前腔靜脈采血,分離血清,測定抗體。
注:同行肩標小寫字母相同者差異不顯著P>0.05);同行肩標小寫字母相鄰者差異顯著(P<0.05).
豬圓環抗體水平分別在12d,54d(免疫后40d)前腔靜脈采血,分離血清,測定抗體。
注:同行肩標小寫字母相同者差異不顯著P>0.05);同行肩標小寫字母相鄰者差異顯著(P<0.05).
試驗中ELISA試劑購自武漢科前動物生物制品有限責任公司,判定標準:
豬瘟:樣品OD630值≥0.35,判斷為陽性(+);樣品OD630值<0.35,判斷為陰性(—)
豬偽狂犬:S(樣品OD630值)/N(陰性對照OD630值)≤0.6,樣品為陽性;S/N值介于0.6到0.7之間疑似;S/N值>0.7判斷為陰性。
豬圓環:樣品OD630值≥0.35,判斷為陽性(+);樣品OD630值<0.35,判斷為陰性(—)
3.結論
甘露聚糖肽的藥理學研究結果發現,α-甘露聚糖肽在消化道內被消化酶分解為低聚甘露聚糖和堿性多肽,低聚甘露糖在腸道內被雙歧桿菌和乳酸菌等有益菌利用,在腸道內產生大量乳酸和醋酸,降低腸道內PH值,抑制了腐敗菌與病原菌的生長;增強了腸道功能,促進蛋白質的消化吸收。
α-甘露聚糖肽具有增強試驗動物單核巨噬細胞的吞噬;激活淋巴細胞,促進機體的免疫應答; 增強和調節體液免疫:增強白細胞介素( I L— l、I L一2 ) 的生成和反應性等多種生物學功能。從試驗結果可以看出,益欣元能夠有效地提高豬瘟、豬偽狂犬及豬圓環病毒抗體水平,增強豬的免疫功能和抗病能力。
益生菌在α-甘露聚糖肽的作用下,能夠更好的增值與定植,改善機體微生物和酶的平衡,并刺激特異性或非特異性免疫機制,達到促進發育、增強體質、提高產量,提高飼料利用率的效果。
從試驗數據可看益欣元在提高仔豬消化率、提高生長速度、降低腹瀉發生率、提高免疫力方面具有顯著效果。